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          嘉兴在线新闻网     2019-05-16 11:33:43     手机看新闻    我要投稿     飞信报料有奖

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          Akt位点那么多,看看磷酸化抗体领导者CST怎么选

          做磷酸化抗体试验时不免会有这样的困惑,关于常见的p-Akt(Thr308)和p-Akt(Ser473)位点,究竟该挑选哪个?关于这个问题,作为磷酸化抗体领导者的CST及CST我国(赛信通)科研团队能够助你一臂之力。

          CST赛信通关于磷酸化抗体Autophagy Signaling信号通路图

          在共享来自CST及CST我国(赛信通)关于的答案之前,先来了解下Akt宗族。Akt也被称为蛋白激酶B(proteinkinaseB,PKB),是一种分子量约为60kDa的丝/苏氨酸蛋白激酶,存在于哺乳动物中的三种同工型。AKT可分为3种亚型(AKT1、AKT2、AKT3或PKBα,PKBβ,PKBγ),3种亚型的功用各异,但也有堆叠。AKT1广泛地散布在安排中,Akt2首要散布在肌肉和脂肪细胞中,而Akt3则在睾丸和大脑中表达。Akt调控多个生物进程,包含细胞存活、增殖、成长和糖原代谢,Akt信号通路与恶性肿瘤、糖尿病、类风湿关节炎等多种疾病的发作开展密切相关,越来越遭到广泛的重视。

          许多成长因子、激素与细胞因子经过结合其同源受体酪氨酸激酶(RTK)、细胞因子受体或GPCR,以及经过触发脂质激酶PI3K的活化来激活Akt,然后在细胞质膜中生成PIP3。Akt经过其普列克底物蛋白同源(PH)结构域与PIP3相结合,导致Akt转位至细胞膜。经过双磷酸化机制,能够激活Akt。相同由于本身PH结构域而转位至细胞膜的PDK1,能够活化Akt的Thr308位点使Akt磷酸化,PDK2再对Akt的Ser473位点磷酸化才干最终导致其彻底活化,也就是说羧基结尾Ser473位点的二次磷酸化关于活性来说也是必要的,并由mTOR-rictor复合体mTORC2完结,活化的Akt引起下流磷酸化级联反应和靶蛋白之间的相互效果。

          CST赛信通关于磷酸化抗体MAP Kinase Signaling信号通路图

          那么,CST及CST我国(赛信通)关于做磷酸化抗体时,磷酸化Akt位点的挑选有什么样的主张?细胞许多生物学功用中,PI3K/Akt信号通路发挥重要的调控效果,在细胞内起按捺凋亡,促进增殖的效果。作为PI3K的下流蛋白,Akt首要有两个重要的磷酸化位点Thr308和Ser473。PI3K不能直接活化Akt,它是经过与细胞内含有PH结构域的信号蛋白Akt和磷脂酰肌醇依靠激酶1(phosohoinositide-dependentkinase1,PDK1)结合,诱导Akt到细胞膜上,然后催化Akt蛋白的Thr308位点发作磷酸化,然后部分激活Akt,可是Akt功用活性的充分发挥还需求Ser473的磷酸化。在许多细胞系(尤其是肿瘤细胞系)中,对Akt功用的按捺多是经过按捺PI3K的功用(如运用PI3K特异性按捺剂LY294002和Wortmannin)而完成的,以p-Akt(Ser473)表达含量的下降为首要目标。PTEN蛋白是PI3K/Akt信号通路的首要负调理蛋白,拮抗PI3K和Akt,使PIP3脱磷酸,经过按捺Akt磷酸化并使其去磷酸化,使得细胞中的Akt磷酸化水平下降,然后阻断PI3K/Akt信号通路,按捺细胞成长,促进细胞凋亡。

          CST赛信通关于磷酸化抗体p53 Signaling信号通路图

          Thr308和Ser473两个位点的激酶或许不同,PDK1磷酸化Akt308,而mTOR激活Akt473,一些研讨标明Thr308的磷酸化会促进Ser473的磷酸化,由于AKT激活的磷酸化次序一般是先Thr磷酸化后Ser磷酸化,即Thr磷酸化后Akt一般都激活了。膜上的PDK1在AKt的Thr308位点将其磷酸化,导致Akt的部分激活。Ser473位点被mTORC2磷酸化,可激起Akt的彻底的酶活性。在挑选位点的时分,能够从效果的激酶来估测哪一个位点或许会发作变化,最直接的位点是检测Ser473,假如两者都检测的话那自然是比较好的。

          CST及CST我国(赛信通)还有一个做磷酸化抗体的主张,即看看这两个位点发作磷酸化润饰对生物学功用的影响。假如是做细胞凋亡、细胞周期、细胞骨架重组、癌症相关的话,Thr308和Ser473两个位点都或许参加其间;假如研讨细胞分解,或许需求多重视下Ser473位点;和蛋白降解相关的一般是Ser473位点;在非小细胞肺癌的研讨中,或许与Thr308位点的磷酸化高度相关。可是有必要要注意的是,信号通路扑朔迷离,最好仍是结合文献,来估测所需检测的磷酸化308位点。

          CST赛信通关于磷酸化抗体Phosphoinositide Signaling信号通路图

          据悉,CST(Cell Signaling Technology)是一家由科学家创建的私营宗族公司,CST我国(赛信通)是CST在我国树立的独资子公司,Jay Dong(董增军)为副总裁兼亚太地区总经理。CST被公认为细胞信号研讨的金规范、最佳抗体、研讨者的首选、PTM(蛋白翻译后润饰)的领导者、2018最高引证抗体品牌等。

          CST赛信通关于磷酸化抗体Warburg Effect信号通路图

          CST供给最高质量的特征信号蛋白及磷酸化、甲基化、乙酰化、泛素化、SUMO化等翻译后润饰抗体,蛋白翻译后润饰挑选试剂盒及服务,还有偶联抗体,二抗,ChIP试剂盒,细胞因子,ELISA试剂盒,细胞检测试剂盒,蛋白试验配套试剂等,供给蛋白相关试验的一站式解决方案。

            (本报记者 武f)


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